EasyGeno单片段重组克隆试剂盒基于DNA序列同源性进行片段重组，可快速将单个片段定向克隆到任意线性化载体中。通过精心设计和严格试验，本试剂盒含有的2×EasyGeno Single Assembly Mix具有的酶活性可将载体和片段的同源区域从双链的3’端进行重组连接，最终得到的无缺口闭环质粒可直接转化感受态细胞筛选克隆。该方案克服了酶切位点的限制，仅需在插入片段PCR引物5’端引入线性化载体的末端序列，使得插入片段5’和3’两端带有载体两端的一致性序列（15-25 bp），即可实现插入片段的定向重组进入载体。重组反应可在恒温条件下快速进行（50 ℃处理15 min），配合灵活的PCR产物处理方式和快速转化方法，数小时内即可完成从DNA样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。

1. 无需考虑酶切位点限制，通过序列同源性15 min实现载体与片段的快速重组。
2. 插入片段的PCR产物正确且单一，无需纯化，可直接与载体进行重组反应。